文／陳晨

  B 肝是危害人類健康的全球性疾病。日前，「HBsAg突變全球多中心研究解讀媒體會」在滬舉行，國立臺灣大學醫學院高嘉宏教授、國家衛生計生委臨床檢驗中心王露楠教授探討了B肝表面抗原（HBsAg）突變對臨床及實驗室檢測帶來的挑戰和影響，HBsAg突變全球多中心研究負責人、羅氏診斷全球醫學科學事務部Mikael Gencay博士則分享了該研究成果。

提高突變檢出率發現隱匿感染

  在B肝病毒的複製過程中，病毒DNA進入宿主細胞核，在DNA聚合?的作用下，兩條鏈的缺口均被補齊， 形成超螺旋共價閉合環狀DNA（cccDNA）。cccDNA是HBV複製的初始範本。血清內HBsAg的水準與cccDNA水準有一定相關性，HBsAg水準的下降不僅反映了cccDNA轉錄或mRNA轉譯的減少，同時也預示著宿主對HBV複製實現了免疫控制。因此，HBsAg水準是抗病毒治療成功的早期指標，其下降速度和幅度可預測治療的長期療效。

  研究資料顯示， 對於低水準HBV DNA （ ＜2000IU/mL）的患者而言，HBsAg水準是一個重要風險因素。當患者HBsAg水準小於1000IU/mL時，每年罹患肝癌的風險為0.06%左右；而當HBsAg水準超過1000IU/mL時，罹患風險提高了5倍，增至0.33%。

  儘管HBsAg具有重要臨床價值，但在實際應用中仍面臨諸多挑戰。由於HBV複製週期快且聚合易錯配，在內源性（宿主免疫清除）和外源性（疫苗和抗病毒藥物）的選擇性壓力作用下，容易選擇出逃避突變株。因選擇性及天然產生的，或經治療誘導的前S/S基因組區域突變在慢性HBV感染患者中非常常見，HBsAg突變會導致患者HBsAg檢測結果為陰性， 但其血清和/或肝臟中仍存在HBVDNA，這種情況稱為隱匿性HBV感染（OBI）。

  高嘉宏教授指出，OBI患者如果作為獻血者或肝移植供體，將會對輸血和手術安全構成重大隱患。同時，HBsAg突變會加速隱匿性乙型肝炎向肝硬化/肝癌進展，並引發免疫抑制後的HBV再啟動，導致檢測試劑漏檢、疫苗保護失敗、抗病毒治療失敗等，對疾病進展和療效判斷造成重要影響。因此，臨床需要更精准的檢測，儘早發現這類患者。

  王露楠教授表示： 「OBI的發生與S基因突變有關，且OBI患者的突變率更高，這對實驗室檢測能力提出了新的挑戰。血清學檢測試劑的設計不僅要滿足靈敏度和特異性，還要具備HBsAg突變檢測的能力，將漏檢的可能性降到最低。傳統的?聯免疫吸附試驗（ELISA）的突變檢測能力有待提高。目前結果顯示，電化學發光法（ECL）具有優異的HBsAg突變檢出能力。」

  麥克.傑凱博士介紹了HBsAg突變全球多中心研究的背景和成果。該研究首次採用真實臨床患者樣本，排除以往使用實驗室製備的“重組”HBsAg蛋白可能存在的潛在偏倚，納入1553名來自非洲、亞洲、歐洲、美洲、拉丁美洲、中東等全球不同流行地區且涵蓋各種重要基因型的HBV感染患者樣本，包括來自中國大陸的407名HBV感染患者樣本。

  研究發現，超過70%的樣本發生了HBsAg突變，且全球範圍內不同流行地區及不同基因型的總體突變率無顯著差異。其中，大部分中國大陸患者樣本為基因型C，而多位元點突變頻率在基因型C感染的人群中更高。在中國樣本中，還發現了136種特有的突變（全球共345種突變），10餘種新的突變體（全球共62種）；在超過30%的中國患者樣本中發現了47種位於「a」決定簇區域的特有突變，這是對於診斷及臨床都非常重要的區域，可能與宿主免疫反應差有關，也可導致慢性HBV感染，還可導致假陰性診斷結果。除此之外，與G145R突變相關的疫苗及診斷逃逸在中國樣本中的發生比例更高，為4%，而全球比例為2%。

  研究還對四種HBsAg商業試劑（包括羅氏診斷Elecsys HBsAg Ⅱ免疫檢測，兩種基於磁珠顆粒的HBsAg免疫檢測以及HBsAg ELISA檢測）進行了性能比較分析。Elecsys HBsAg Ⅱ的靈敏度最高，達到99.94%，並成功識別出研究中所有（含突變體）的真實臨床患者樣本，證實了HBsAg突變對該試劑的檢測性能沒有影響麥克.傑凱y博士表示： 「研究證明，HBsAg突變在HBV感染患者中非常常見，且具有較高的發生率—比之前所報導的資料高出3倍。對存在大量HBsAg突變患者的現狀， 使用Elecsys HBsAg Ⅱ免疫檢測對患者進行管理是非常安全、可靠的。」

  Elecsys HBsAg Ⅱ定性和定量檢測試劑均採用獨特的抗原抗體反應體系設計，並使用3種單克隆抗體和1種多克隆抗體的組合，能夠檢測到目前所有已知的HBV血清型，並有利於提高HBsAg突變的檢出能力，對於HBV感染的篩查、診斷和監測具有重要價值。